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保護(hù)柱是液相色譜分析中重要的色譜耗材
點(diǎn)擊次數(shù):1572 發(fā)布時(shí)間:2022-10-11
保護(hù)柱是液相色譜分析中重要的色譜耗材
在液相分析檢測樣品的過程中,色譜柱會(huì)受到來自于樣品及色譜系統(tǒng)的污染,從而導(dǎo)致色譜柱耐用性差、壽命縮短。
來自于色譜系統(tǒng)的污染主要指,HPLC儀器系統(tǒng)中部件磨損而產(chǎn)生的固體顆粒,以及流動(dòng)相系統(tǒng)過濾不*殘留的固體顆粒。來自于樣品的污染主要指,未*溶解的樣品或者已*溶解的樣品進(jìn)入色譜系統(tǒng)中,由于樣品溶劑和流動(dòng)相溶劑對樣品溶解存在的溶解度差異,導(dǎo)致沉淀析出污染系統(tǒng)。
是對于中藥、天然產(chǎn)物、合成中間體及生物藥品的檢測,因基質(zhì)的復(fù)雜性,色譜柱受污染的情況會(huì)較加嚴(yán)重。污染會(huì)導(dǎo)致色譜系統(tǒng)壓力升、色譜柱塌陷、填料變色等,從而帶來檢測成本,測試結(jié)果不等各種影響。
保護(hù)柱是液相色譜分析中重要的色譜耗材,使用保護(hù)柱可降低分析柱受污染的程度,延長分析柱使用壽命。
保護(hù)柱位于進(jìn)樣器與分析柱之間,作用主要兩方面:
1.截留不溶性顆粒
2.吸附樣品基質(zhì)中的雜質(zhì)
一、如何選擇保護(hù)柱?
1.保護(hù)柱的填料,與分析柱保持一致!填料品牌一致,才能確保選擇性一致。
2.保護(hù)柱的規(guī)格,要與分析柱匹配!填料粒徑一致,保護(hù)柱的內(nèi)徑與分析柱的內(nèi)徑相近。
3.對于精細(xì)分離,保護(hù)柱本身的裝填柱效要足夠好!
4.對于精細(xì)分離或者小內(nèi)徑色譜柱分離,保護(hù)柱的連接死體積要盡可能小。
5.如果是用于UHPLC柱,還要考慮保護(hù)柱的耐壓能力。
保護(hù)柱不理想,就會(huì)導(dǎo)致峰擴(kuò)散,分離度下降,不利于精細(xì)分離。
理想的保護(hù)柱,即使分析柱短小如4.6×100mm,安裝保護(hù)柱后也未引起分離度與峰的降低。
二、如何使用保護(hù)柱?
1.柱。避免保護(hù)柱成為不同項(xiàng)目的交叉污染源。
2.及時(shí)更換保護(hù)柱。當(dāng)峰的理論塔板數(shù)下降15%,或是柱壓上升15%,或是關(guān)鍵分離度下降15%時(shí),都應(yīng)該及時(shí)更換保護(hù)柱。
3.不慎發(fā)生污染時(shí),可以將分析柱卸下,單沖洗保護(hù)柱,可以使污染物更快的從保護(hù)柱中流出?!遣豢梢月暠Wo(hù)柱。
三、保護(hù)柱使用注意事項(xiàng)
1.立式保護(hù)柱與分析柱連接時(shí),連接管路盡可能短,且接口切面平滑,盡量減少死體積以降低柱外展寬效應(yīng)。
2.卡套式保護(hù)柱一般未標(biāo)注液流方向,使用時(shí)******自行標(biāo)注,并按照標(biāo)注方向來使用,以免正反向使用后,截留的雜質(zhì)污染分析柱。
3.直接填裝的短柱型保護(hù)柱,出現(xiàn)柱壓升或峰型變差時(shí),可不接分析柱進(jìn)行反向清洗,清洗溶劑可參考分析柱清洗溶劑。
4.卡套式保護(hù)柱,柱芯替換時(shí),注意柱芯與柱套是否存在方向上的匹配,同時(shí)不易旋擰過緊,以防滑絲。
5.保護(hù)柱或柱芯一般不建議聲清洗,因可能對填料表面修飾有影響。
6.如同一保護(hù)柱配不同的分析柱使用,每次使用前,保護(hù)柱需清洗并用流動(dòng)相平衡保護(hù)柱一段時(shí)間后,再接分析柱使用。